خمیر کے خلیے کی دیوار میں بنیادی طور پر گلوکن کے ساتھ ساتھ کچھ مینوپروٹین، پروٹین، لپڈس اور تھوڑی مقدار میں چائٹین بھی ہوتی ہے۔ خمیر گلوکن بنیادی طور پر الکلی میں گھلنشیل گلوکن ہے۔ Alkali-insoluble glucan ایک فعال polysaccharide ہے۔ تیاری کی کلید پروٹین، منن اور لپڈ جیسی نجاست کو دور کرنا ہے۔ فی الحال، اندرون اور بیرون ملک خمیر گلوکن کی تیاری کے اہم طریقوں میں ایسڈ بیس کا طریقہ، انزیمیٹک طریقہ اور آکسیڈیٹیو نکالنا شامل ہیں۔
1.1 ایسڈ بیس کا طریقہ
Mannaners [1] نے خمیر سے گلوکن نکالنے کے لیے سب سے پہلے ایسڈ بیس کا طریقہ استعمال کیا، اور ولیمز وغیرہ کی بہتری کے بعد، ایک مستحکم عمل تشکیل پایا۔ CHUNG [2] کے ذریعے مطالعہ کیا گیا الکلی ٹریٹمنٹ کے عمل: 80 گرام خمیری سیل وال لیں اور اسے 1000mL 4% NaOH محلول میں معطل کریں، اسے 1h کے لیے 95 ڈگری پر رکھیں، سینٹری فیوج، 2000mL 3% NaOH محلول میں ناقابل حل مادے کو معطل کریں، اسے رکھیں۔ 3 گھنٹے کے لیے 75 ڈگری پر، سینٹری فیوج، آست پانی میں غیر حل پذیر مادے کو معطل کریں، پی ایچ کو 4.5 تک برقرار رکھنے کے لیے ہائیڈروکلورک ایسڈ کا استعمال کریں، اسے 1 گھنٹے کے لیے 75 ڈگری پر رکھیں، خمیر گلوکن حاصل کرنے کے لیے سینٹری فیوج، دھو، پانی کی کمی اور خشک کریں۔ تیزاب کے علاج کے عمل میں، تیزاب کے انتخاب کا گلوکن کی پیداوار پر بہت زیادہ اثر پڑتا ہے۔ تیزاب بہت کمزور ہے، اور تیزاب میں گھلنشیل گلائکوجن اور بیٹا-1،6-گلوکان مکمل طور پر نہیں ہٹائے گئے ہیں۔ بہت زیادہ تیزابیت الکلی میں حل نہ ہونے والے گلوکن کے انحطاط کا باعث بنے گی اور پیداوار کو کم کرے گی، اس لیے ایسٹک ایسڈ pH=4.5 کو ایڈجسٹ کرنے کا بہترین انتخاب ہے۔
1.2 انزائم کا طریقہ
فریمنڈ [3] خمیری گلوکن تیار کرنے کے لیے خمیری خلیے کی دیوار کے علاج کے لیے انزیمیٹک طریقہ استعمال کرتا ہے: 1.3kg خمیری سیل وال لیں اور 8.8L پانی ڈالیں، pH=7 کو ایڈجسٹ کریں۔{6}}، 125 ڈگری پر 5 گھنٹے کے لیے رکھیں۔ سینٹرفیوگیشن کے بعد دو بار دھوئیں، 10L غیر حل پذیر مادے میں پانی ڈالیں، الکلائن پروٹیز کے ساتھ علاج کریں - Savinase 5h کے لیے، سینٹری فیوج، دھو کر خشک کریں، اور پھر 85% سے زیادہ مواد کے ساتھ ڈیکسٹران کے نمونے حاصل کرنے کے لیے ایتھنول یا ایسیٹون سے دھو لیں۔ تانگ ژیو [4] نے خمیر کے خلیے کی دیوار کو انزائم-الکالی کے امتزاج کے طریقہ سے نکالا، آٹولائزڈ خمیر کو پاپین کے ساتھ 18 گھنٹے تک علاج کیا، اکٹھا کیا اور تیز کیا، اور اعلی درجہ حرارت پر 3 گھنٹے کے لیے 2% NaOH کے ساتھ علاج کیا۔ نمونے کا پولی سیکرائڈ مواد 87٪ سے زیادہ تھا، اور پیداوار 10٪ تھی۔ Zhao Guangyuan [5] نے 24 گھنٹے کے لیے 57 ڈگری پر پروٹیز کے ساتھ خمیر کے خلیے کی دیوار کا علاج کیا، پھر 3.5 گھنٹے کے لیے 60 ڈگری پر 2% NaOH کے ساتھ پریسیپیٹیٹ کو سینٹری فیوج کیا، خمیر گلوکن کا نمونہ حاصل کرنے کے لیے سینٹرفیوج کیا، دھویا اور خشک کیا۔
خمیر سیل کی دیوار کا انزیمیٹک علاج پروٹین کی ایک بڑی مقدار کو ہٹا سکتا ہے، اس طرح بعد میں الکلی کی حراستی اور استعمال کو کم کر سکتا ہے۔ خمیر گلوکن کی مصنوعات کی سالماتی ساخت زیادہ مکمل ہے، اور گلوکن کی سالماتی ساخت اس کی حیاتیاتی سرگرمی سے گہرا تعلق رکھتی ہے۔ لہذا، بڑے پیمانے پر خمیر گلوکن کو نکالنے اور صاف کرنے کے لئے انزیمیٹک طریقہ زیادہ موزوں ہے.
[1] آداب، ڈی جے، میسن، اے جے، اور پیٹرسن، جے سی (1973a)۔ خمیر سیل کی دیواروں سے a -(1-3)-D-گلوکان کی ساخت۔ بائیو کیمیکل جرنل، 135(1):19-30۔
[2] چنگ، بونگ - ہیون۔ پارک، جیونگ ہون وغیرہ۔ ترکیب جس میں saccharomyces cerevisiae IS2 سے گھلنشیل گلوکن اولیگومر شامل ہے جو مدافعتی ایکٹیویشن یا کینسر کی روک تھام اور علاج اور اس کی تیاری کا طریقہ ہے۔ PCT [P]۔ایپ l.WO2004۔
[3] فریمنڈ، ایس، ساوٹر، ایم، کپیلی، او، اور ڈلٹر، ایچ (2003)۔ 1،3-بیکر کے خمیر Saccharomyces cerevisiae سے اعلی پاکیزگی کے bD-glucan کے لیے ایک نیا غیر تنزلی تنہائی کا عمل۔ کاربوہائیڈریٹ پولیمر، 54، 159–171۔
[4] تانگ زیو، وانگ ہوا، ژیونگ شان بائی۔ آٹولائسز-انزائم-الکالی طریقہ سے بیئر کے خمیر کو نکالنا - 1،3-گلوکان [جے] کے عمل پر مطالعہ۔ ماڈرن فوڈ سائنس اینڈ ٹیکنالوجی، 2006 (02)
[5] زاؤ گوانگ یوان۔ بیئر خمیر [جے] کے آٹولائسز کی باقیات سے الکلی غیر حل پذیر گلوکن کی تیاری پر مطالعہ۔ ہوازہونگ زرعی یونیورسٹی کا جرنل (قدرتی سائنس ایڈیشن)، 1997 (2)
